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吗啡依赖与戒断过程中猕猴依伏神经核的蛋白质组响应



单位:四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室国家成都中药安全性评价中心

合作内容:脑组织双向电泳结合串联质谱鉴定

研究简介:通过研究吗啡依赖以及药物干预戒断后的猕猴脑组织伏隔核区的蛋白质组变化,发现了代谢和线粒体功能,突触传递,细胞骨架蛋白,氧化应激,信号转导和蛋白质的合成和降解等多类蛋白的表达发生了明显变化。其中的14个白在停止药物干预后仍旧持发生持续表达变化,对于进一步地揭示药物干预潜在机理以及达到吗啡成瘾戒断的治疗目标有重要意义。该研究有助于我们全面了解灵长类动物在吗啡依赖和戒断治疗过程中的神经病理学,这对于戒断治疗的发展是非常有帮助的。


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  非测序物种重要基因的克隆


合作内容:某重要蛋白的denovo测序分析
 研究简介:丰益生物是世界食品行业巨头,旗下有金龙鱼等多个知名产品。丰益生物上海研发中心发现某非测序植物中A蛋白和研究目标密切相关。对A蛋白进行SDS-PAGE分离纯化后结合串联质谱进行数据库比对分析,由于该蛋白来自于非测序生物,比对后未发现理想结果。进一步的denovo测序分析获得了4个酶解肽段的准确序列,每个序列的氨基酸残基数在8-20个不等。选择合适的片段转换成cDNA序列,并根据该序列设计引物,对该蛋白的基因进行克隆和测序,顺利获得该蛋白所代表的基因的全长,为后续的转基因工作奠定了基础

三  同位素标记定量(iTRAQ)
一、简介
    同位素标记相对和绝对定量(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation,  iTRAQ)技术的发展得益于可进行多重标记的iTRAQ试剂的开发,该试剂结构由指示基团、中性平衡基团和反应基团三部分组成。不同指示基团及其相对应平衡基团的质量和都相同,而反应基团能与赖氨酸ε氨基和所有肽链的氨基末端连接,可标记所有氨基酸。不同标记试剂与来源于不同样品胰酶消化后的肽段结合,经过色谱分离,并通过一级质谱和二级质谱。平衡基团在二级质谱时发生中性丢失,而报告基团在二级质谱低质量区域产生多个报告离子,其信号强度分别代表该标记样品的表达量,根据报告离子的峰面积计算同一蛋白质同一肽段在不同样品间的比值,从而实现蛋白的相对和绝对定量。
二、技术流程

三、服务优势
1  通量高
    4标的试剂盒最多可以同时进行4个样品的蛋白质分离鉴定和定量,最新的8标试剂盒可以同时进行8个样品的分离鉴定和定量,提高了实验通量,可以进行多个时间点蛋白质组的动态监测
2  重复性好
    来源不同的样品可以同时进行色谱分离和质谱鉴定,大大增强实验的重复性,最低可以检测到不同样品间5%的蛋白差异变化
3  定量准确
    在碰撞诱导的解离后进行第二级质谱分析时,带不同同位素标签的同一多肽产生质量不同的报告离子,通过比较报告离子的丰度可获得样品间相同多肽的丰度差异,定量更为准确
4  鉴定结果可靠
    二级质谱可以产生很好的y、b离子系列,蛋白序列覆盖率提高,鉴定结果更可靠,同时一个蛋白质有多个肽段被鉴定,进一步提高了定量的准确性
5  操作简单、蛋白检测范围广
    标记过程简单,反应速度快,质谱检测灵敏。此外,iTRAQ实验在肽段水平上进行蛋白的分离和鉴定,大大提高膜蛋白等难溶性蛋白的溶解性,扩大蛋白的检测范围
四、技术服务内容
1、蛋白样品制备,定量,酶解,标记
2、反相色谱分离,强阳离子交换色谱分离
3、串联质谱定量与定性,数据库检索
4、相关生物信息学分析
5、实验报告提交
五、送样须知
1、样品要求:不同样品所需的量不同,详细请咨询本公司。
2、寄送须知:样品需低温保存的,用干冰保存快递。
3、样品登记表格下载:寄样之前请下载附件的样品登记表,填写样品信息打印出来随样品一起寄出。
六、实验周期和收费标准:咨询本公司

四    多肽组分析
一、简介
       
    内源性多肽大多为蛋白水解的产物,在生物特别是动物的生理和病理过程中扮演着重要角色。以生物细胞或体液内所有内源性多肽成分为研究对象的多肽组学是蛋白质组学研究的一个重要分支,通过研究内源性多肽的变化规律以及结构和功能,一方面可以成为蛋白质组学研究的有益补充,同时也可以成为分子标志物特别是疾病标志物筛选的重要来源,为疾病的早期诊断、预后以及动态检测提供重要依据。

二、技术流程


三、服务优势
 
1.样品准备简单       
   
   客户只需把体液或其它样品准备好即可,博苑生物可以提供从内源性多肽分离富集到多肽鉴定以及后续数据分析的全步骤
 
2.数据准确性高
     
   与非标记(Label free)蛋白质组方法类似,对液相色谱分离及串联质谱鉴定的稳定性和重复性要求较高,需要有足够的技术重复以确证结果的可靠性

3.服务能力全面
       
   可同时提供多肽组数据与蛋白质组数据并结合相应的生物信息学分析,使得整个实验更具系统性,得到的结果更可靠

四、服务内容及试验周期、收费标准请咨询本公司 


 

 

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